Cell Counting Kit-8(簡稱CCK-8),是一種基于WST-8而廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。
CCK-8試劑中含有WST-8(化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽)是一種類似于MTT的化合物,它在電子耦合試劑1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)存在條件下,可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原為具有高度水溶性的橙黃色甲瓚產(chǎn)物Formazan (參考圖1),生成的Formazan數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析,細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。
CCK-8與以往的增殖/毒性測定試劑相比,具有明顯優(yōu)點(參考表1)。CCK-8試劑盒具有靈敏度高、反應(yīng)時間短、線性范圍寬、數(shù)據(jù)可靠、重現(xiàn)性好等特點,可以廣泛應(yīng)用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗。
表1. 增殖/毒性測定試劑的比較
檢測方法
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MTT法
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XTT法
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WST-1法
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CCK-8法
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甲瓚產(chǎn)物的水溶性
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差(需加有機溶劑溶解)
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好
|
好
|
好
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檢測靈敏度
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高
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很高
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很高
|
最高
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檢測時間
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較長
|
較短
|
較短
|
最短
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檢測波長
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560-600nm
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420-480nm
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420-480nm
|
430-490nm
|
細胞毒性
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高,細胞形態(tài)完全消失
|
很低,細胞形態(tài)不變
|
很低,細胞形態(tài)不變
|
很低,細胞形態(tài)不變
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試劑穩(wěn)定性
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一般
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較差
|
一般
|
很好
|
批量樣品檢測
|
可以
|
非常適合
|
非常適合
|
非常適合
|
便捷程度
|
一般
|
便捷
|
便捷
|
非常便捷
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Cell Counting Kit-8(簡稱CCK-8),是一種基于WST-8而廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。
CCK-8試劑中含有WST-8(化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽)是一種類似于MTT的化合物,它在電子耦合試劑1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)存在條件下,可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原為具有高度水溶性的橙黃色甲瓚產(chǎn)物Formazan (參考圖1),生成的Formazan數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析,細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。
CCK-8與以往的增殖/毒性測定試劑相比,具有明顯優(yōu)點(參考表1)。CCK-8試劑盒具有靈敏度高、反應(yīng)時間短、線性范圍寬、數(shù)據(jù)可靠、重現(xiàn)性好等特點,可以廣泛應(yīng)用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗。
表1. 增殖/毒性測定試劑的比較
檢測方法
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MTT法
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XTT法
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WST-1法
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CCK-8法
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甲瓚產(chǎn)物的水溶性
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差(需加有機溶劑溶解)
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好
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好
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好
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檢測靈敏度
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高
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很高
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很高
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最高
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檢測時間
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較長
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較短
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較短
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最短
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檢測波長
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560-600nm
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420-480nm
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420-480nm
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430-490nm
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細胞毒性
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高,細胞形態(tài)完全消失
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很低,細胞形態(tài)不變
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很低,細胞形態(tài)不變
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很低,細胞形態(tài)不變
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試劑穩(wěn)定性
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一般
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較差
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一般
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很好
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批量樣品檢測
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可以
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非常適合
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非常適合
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非常適合
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便捷程度
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一般
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便捷
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便捷
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非常便捷
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象形圖 |
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警示語 |
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Class |
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警告聲明 |
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UNub |
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危險聲明 |
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Packing Group |
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